原标题：乙肝在研新药细胞穿透肽，无PNA动物模型，表现抗HBV活性
细胞穿透肽（CPP），在乙肝病毒治疗性寡核酸传递中应用，近日被全球科学家提出并发表在2020年12月21日Pharmaceuticals（药物化学与药物科学期刊）。研究人员介绍，单独使用PNAs或siRNA均表现出潜在抗HBV治疗价值，那么，什么是CPP，它在抑制乙肝病毒复制方向与以往核苷（酸）类似物机制有何区别？
乙肝在研新药细胞穿透肽，无PNA动物模型，表现抗HBV活性
目前，RNAi是被全球科学家证明，应用于抗HBV治疗有前途的一种方法，当然CPP只是2020年末才被发现。其作用机制是，PNA作为抗病毒药物的主要困难在于，其在脂质双层膜上的转运和在细胞内的分布，因此科学家才将抗εPNA偶联到阳离子细胞穿透肽（CPP）。在鸭原代肝细胞（PDH）感染DHBV后，研究人员观察了抗εPNA与多精氨酸（Arg）7或核定位信号（NLS）CPP偶联的抗病毒作用。
单独使用细胞穿透肽（CPP）的抗病毒活性
结果表明，多聚精氨酸（PNA）具有很强的抑制作用。因此，研究人员继续了CPP单独使用后，是否同样具有潜在抗慢性乙肝价值。已有报道了CPPs的生物活性，其中包括抗病毒活性。另外，CPPs对单纯疱疹病毒（HSV）和HIV等包膜病毒的抗病毒活性研究较多。事实上，全球真正研究CPPs抑制HBV复制能力的研究项目，是很少或还没有的。
因此，本研究人员为找到一种有效抗HBV方法，评估了一些分子，比如PNA单独使用或与CPPs结合使用。让人惊讶的是，结果发现，其中一些CPP在没有PNA的情况下，表现出了抗HBV活性。研究人员进一步使用了（D-Arg）8肽治疗DHBV感染的PDH或DHBV感染的雏鸭，在鸭子乙肝病毒感染模型中。结果表明，（D-Arg）8的这种抗病毒活性可能会影响CPP-PNA结合物的序列特异性。
还使用相同的DHBV感染模型，在稳定转染DHBV的鸡肝癌细胞（LMH-D2）和PDH培养物中研究了脂质修饰的CPPs肽（如癸烷酰基-（D-Arg）8）对肝病毒复制的抑制作用。研究结果表明，使用不同浓度的癸酰-（D-Arg）8处理这些细胞后，病毒复制能力显著下降，且呈剂量依赖性。事实上，癸酰基-（D-Arg）8可以抑制病毒复制的后期阶段。
更重要的是，这种抑制作用要比用（D-Arg）8获得的抑制作用更大，这说明（D-Arg）8所显示的抗病毒效果可以通过修饰这种CPP的两亲分子来改善。有趣的是，这些研究结果有望推广到人类病毒，因为稳定的HBV转染细胞系HepG2.2.15的治疗，导致了HBV分泌的剂量依赖性抑制（观点来自：Pharmaceuticals）。在另一项研究中，几种含有精氨酸7的人工重组肽被用于治疗HepG2.2.15细胞。
研究结果表明，这种CPP能有效地进入HepG2.2.15，阻断乙肝病毒核衣壳组装，抑制HBV的释放。目前，许多其他寡核苷酸的非病毒船体系统被使用在这个方向。科学家为了提高其细胞内摄取，寡核苷酸还可以与糖、脂质、聚合物、适体等结合。所以，这些寡核苷酸偶连物的治疗潜力在增加。以上就是，CPP单独使用后，未来可能作为潜在的抗HBV药物。
什么是结合糖寡核苷酸？
根据以往文献记载，寡核苷酸可以和几种糖共价结合，比如半乳糖或乳糖。结果表明，这些寡核苷酸在与碳水化合物的偶联，增强了它们进入肝细胞的能力以及稳定性。另外，在肝细胞膜上，研究人员还注意到，唾液酸糖蛋白受体（ASGP-R）是第一个被定义的哺乳动物凝集素。它们通过受体介导的内吞机制，在肝细胞摄取结构中，含有半乳糖末端水化合物的几种生物分子中，发挥着重要作用。
所以，负责发表这项结论的研究人员认为，碳水化合物siRNA结合物在体外、肝癌细胞系和体内小鼠模型中，都表现出强的基因沉默水平。研究人员还评估了糖修饰的CPP-PNA结合物，在HepaRG人肝癌细胞系中的抗HBV活性，结果表明，抗S-PNA结合乳糖治疗HBV感染的HepaRG细胞可增加其摄取量并减少HBsAg释放量。
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